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上海亞榮旋轉蒸發儀提取茶樹老葉的茶多酚的驗證方法

上海亞榮生化儀器廠

主要儀器、試劑、供試材料

雙光束紫外可見分光光度計、RE-52AA旋轉蒸發儀、SHZ-III循環水式多用真空泵、電熱恒溫水浴鍋。

純化水、50%乙醇、氯仿、乙酸乙酯、兒茶素對照液、香草醛、鹽酸

分別稱取兩份過40目篩的茶樹老葉粉末10.0g于250ml圓底燒瓶中, 分別向其中加入100ml 80℃純化水, 用恒溫水槽在60℃下提取45min。后用真空泵抽濾, 濾渣再加100ml浸提液提起, 共提取三次, 后合并三次濾液, 60℃下濃縮。濃縮液用50ml氯仿脫咖啡因兩次。棄去氯仿層。水層用等體積乙酸乙酯萃取三次, 萃取完成后, 將乙酸乙酯相在旋轉蒸發儀中40℃下減壓蒸餾, 濃縮萃取物并回收乙酸乙酯。得到的濃縮物于60℃下干燥, 便得到茶多酚樣品。2.3 醇提茶多酚分別稱取兩份過40目篩的茶樹老葉粉末10.0g于250ml圓底燒瓶中, 分別向其中加入100ml 50%乙醇, 用恒溫水槽在60℃下提取45min。后用真空泵抽濾, 濾渣再加100ml浸提液提起, 共提取三次, 后合并三次濾液, 濾液用旋轉蒸發儀在60℃下減壓濃縮, 并回收乙醇。濃縮液用50ml氯仿脫咖啡因兩次。棄去氯仿層。水層用等體積乙酸乙酯萃取三次, 萃取完成后, 將乙酸乙酯相在旋轉蒸發儀中40℃下減壓蒸餾, 濃縮萃取物并回收乙酸乙酯。得到的濃縮物于60℃下干燥, 便得到茶多酚樣品。2.4 含量測定兒茶素是茶多酚類物質中有價值的組分, 因此本試驗是以茶多酚提取物中兒茶素的含量作為評價各種提取方法的好壞以及茶多酚樣品質量高低的依據。本研究所采用的分析方法是香草醛顯色法。2.4.1 樣品液和對照品液以及顯色劑的制備。精密稱取樣品0.0500g, 用水超聲溶解 (30min) , 移入50ml容量瓶中, 加水稀釋至刻度, 搖勻, 即得樣品溶液。精密稱取兒茶素對照品0.0129g, 置25ml容量瓶中, 乙醇加至刻度, 溶解搖勻, 即對照品溶液。取香草醛1g, 加鹽酸100ml使溶解, 即得1%香草醛濃鹽酸試液。

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