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上海亞榮旋蒸儀對甘蔗葉低聚木糖的分離純化

上海亞榮生化儀器廠

摘要:上海亞榮生化儀器廠研究低聚木糖水解液分別經過酸析脫色和活性炭脫色,旋轉蒸發儀濃縮純化處理,得到純度較高的低聚木糖產品。通過對酸析和改性活性炭脫色條件優化,得到的優化脫色條件是:酸析脫色pH3.0,脫色溫度50 ℃;活性炭用量是10%(w/v, 活性炭/溶液),初始pH值是3.0,脫色溫度是80 ℃,脫色時間是100 min,此時的脫色了為55.06%。兩種方法結合脫色率是68.96%。用上海亞榮RE-5299型旋轉蒸發儀將經過脫色處理的低聚木糖水解液進行濃縮,并輔以乙醇繼續濃縮得到濃縮糖漿,其中的低聚木糖含量達到32.08%(w/w,低聚木糖對固形物)。

  關鍵詞:旋轉蒸發器;低聚木糖;上海亞榮;純化;酸析;活性炭;脫色

  利用甘蔗葉高溫蒸煮預處理結合酶解的方式制備低聚木糖液粗產品,其色澤呈褐色并且糖液中有許多無機離子,必須對粗產品進行精制處理。酶解后的低聚木糖溶液呈褐色,主要是制備過程中產生的些色素引起的,主要包括以下幾部分:低聚木糖制備過程中生成的可溶性木質素;低聚木糖生產過程中的成色反應產生的色素。成色反應主要有:①焦糖化反應;②木糖等還原糖與氨基酸的美拉德反應;③木糖等還原糖的酸降解反應。本文探討的是低聚木糖水解液的純化,重點研究利用改性活性炭對低聚木糖水解液脫色的影響因素,以活性炭脫色的主要影響因素:活性炭用量、脫色時間、脫色溫度、溶液pH優化工藝條件,并進行蒸發濃縮,希望得到純度較高的低聚木糖產品。

  濃縮:用上海恒平生產的FA2004型電子天平稱取100 g甘蔗葉按照上述高溫蒸煮、酶解、脫色工藝處理后的低聚木糖水解液于上海亞榮RE-5299型旋轉蒸發儀中進行濃縮,濃縮過程中可以除去部分有機酸、糠醛等,當低聚木糖溶液濃縮到原來體積的1/4時,加入200 mL乙醇,若有沉淀則過濾除去,繼續濃縮得到濃縮糖漿,其中的低聚木糖含量達到32.08%(w/v,對固形物)。

  1 材料及方法

  1.1 實驗材料

  甘蔗葉低聚木糖水解液,上海活性炭廠生產的顆粒狀活性炭。

  1.2 主要試劑

  D-(+)木糖、3,5-二硝基水楊酸、苯酚、氫氧化鈉、酒石酸鈉、鹽酸、三氯化鐵、無水乙醇、生石灰、硫酸:分析純。

  1.3 主要儀器

  紫外可見分光光度計756PC型:上海舜宇恒平科學儀器有限公司;微型植物試樣粉破FZ102:江西南昌紅燕采制樣設備有限公司;高速臺式離心機TG16-WS:湖南湘儀;掃面電子顯微鏡S570:日立公司;手提式壓力蒸汽滅菌鍋YX-280A:;SHZ-82A恒溫振蕩器:金壇市醫療器械廠。

  1.4 實驗方法

  1.4.1 低聚木糖水解液的制備 用蒸餾水將甘蔗葉在60 ℃下浸泡12 h,然后經過高溫蒸煮預處理(液固比10:1,蒸煮溫度126 ℃,蒸煮時間1h),之后加入真菌木聚糖酶在定條件下酶解(液固比13,酶用量40 U/g干基,酶解溫度60 ℃,pH6.0,反應時間2.5 h),沸水浴滅酶10 min,用湖南湘儀TG16-WS型離心機離心過濾得到低聚木糖水解液,并測定此時水解液中總糖含量,備用。

  1.4.2 酸析脫色 于100 mL燒杯中加入50 mL固形物含量約為30%的低聚木糖液,調節至定的pH,定溫度下靜止20 min,后在3000 r/min離心15 min。取上清液,經0.45 μm微濾后進行成分分析或進行進步精制處理。

  1.4.3 活性炭脫色 活性炭預處理將活性炭顆粒用0.25 mol/L鹽酸溶液浸泡24 h,過濾,用蒸餾水洗至中性,濾干,然后置于烘箱內在120 ℃的溫度下干燥8 h,冷卻至室溫,備用。活性炭氨水改性將活化活性炭加入25%氨水溶液中,在65 ℃震蕩4 h,過濾后洗至中性,濾干,然后置于烘箱內在120 ℃的溫度下干燥8 h,冷卻至室溫,備用。活性炭的脫色效果及條件優化:活性炭用量為1.5%,80 ℃水浴中攪拌30 min后,冷卻至室

溫,比較兩種活性炭的脫色效果。選擇合適的活性炭,以活性炭脫色的主要影響因素:活性炭用量、脫色時間、脫色溫度、溶液pH,進行單因素試驗設計,以脫色率為考察目標,進行條件優化。

  1.4.4 濃縮 用旋轉蒸發儀將經過脫色處理的低聚木糖水解液進行濃縮,當低聚木糖溶液濃縮到原體積的1/4時,加入乙醇,若有沉淀則過濾除去,繼續濃縮得到濃縮糖漿。

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